冰凍切片包埋劑及使用方法

時(shí)間：2012/7/3閱讀：3630

上海寶葉生物科技有限公司

冰凍切片包埋劑及使用方法

OCT 冰凍切片包埋劑是一種聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物，目前已廣泛用于免疫組化實(shí)驗(yàn)室中，

其用途是在冰凍切片時(shí)支撐組織，以增加組織的連續(xù)性，減少皺折及碎裂。又因OCT 混合物為水溶性，故

在漂片時(shí)可溶于水，所以在以后的染色中不會(huì)增加背景染色。

利用OCT 混合物（opti-mum cutting temperature compound）預(yù)先浸潤組織，然后再進(jìn)行恒冷箱切片，

使切片質(zhì)量得到改善。

目前實(shí)驗(yàn)室使用的冰凍切片包埋劑主流產(chǎn)品是日本櫻花公司的O.C.T. Compound ，貨號(hào)：4583，118ml/

瓶，質(zhì)量穩(wěn)定，研究者比較熟習(xí)。

在使用OCT 進(jìn)行包埋時(shí)，對(duì)于包埋模具而言，您可以選擇廠家已有的產(chǎn)品，也可以根據(jù)實(shí)際條件利用手

邊已有的包埋管、包埋板等；也有心靈手巧的研究者自己利用銅版紙折疊出很漂亮實(shí)用的OCT 包埋模具（當(dāng)

然前提是您的用量要少）。

OCT 包埋劑（SAKURA 產(chǎn)品）包埋流程:

1. 將放在蔗糖溶液中的組織塊取出，放入20g L-1 蔗糖與OCT 包埋劑1：1 體積比例混合液中，室溫浸

泡2h

2. 移入OCT 包埋劑中室溫浸泡4h，更換新的OCT 包埋劑，室溫浸泡6h.

3. 將標(biāo)本置于托物臺(tái)，用恒冷箱切片機(jī)切片（一般-22℃），片厚10μm，貼于預(yù)處理的載玻片上，-20℃

冰箱保存。

在實(shí)際工作中，有研究者發(fā)現(xiàn)當(dāng)包埋的樣本體積較大或者冰凍溫度要求更低一點(diǎn)時(shí)，使用櫻花的Oct（貨

號(hào)：4583）進(jìn)行包埋往往很難取得理想的包埋結(jié)果。當(dāng)您遇到這樣的麻煩時(shí)，我們建議您采用另外一種Oc

t 包埋劑Tissue Freezing Medium，美國TBS 公司生產(chǎn)（貨號(hào)：72592）。

如果該文對(duì)您的學(xué)習(xí)和研究能有絲毫幫助，我們都會(huì)備感欣慰

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