amrescoBradford法蛋白檢測(cè)試劑盒140430
檢測(cè)原理
染料特性:考馬斯亮藍(lán)G-250在酸性溶液中處于游離狀態(tài)時(shí)呈棕紅色,最da吸收波長(zhǎng)為465nm,其分子可通過靜電作用和疏水作用與蛋白質(zhì)結(jié)合[6];
顯色反應(yīng):當(dāng)考馬斯亮藍(lán)G-250與樣本中的蛋白質(zhì)結(jié)合后,會(huì)形成穩(wěn)定的染料-蛋白復(fù)合物,其最da吸收波長(zhǎng)紅移至595nm,溶液顏色從棕紅色轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色[5];
定量關(guān)聯(lián):在一定的蛋白質(zhì)濃度范圍內(nèi),染料-蛋白復(fù)合物的顯色強(qiáng)度與樣本中總蛋白的含量呈正相關(guān),檢測(cè)波長(zhǎng)建議為595nm(或560-610nm之間的其他波長(zhǎng))[3];
結(jié)果判定:通過酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)測(cè)定595nm處的吸光度(OD值),結(jié)合BSA標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線,可定量計(jì)算出樣本中總蛋白的具體濃度[3]。
產(chǎn)品特點(diǎn)
品牌可靠:Amresco原裝試劑,質(zhì)量穩(wěn)定,批次間差異小,檢測(cè)結(jié)果重復(fù)性優(yōu)良,契合科研實(shí)驗(yàn)對(duì)試劑純度及穩(wěn)定性的要求[1];
靈敏度高:優(yōu)化染色反應(yīng)體系,可檢測(cè)到樣本中微量蛋白,能精準(zhǔn)捕捉低濃度蛋白的細(xì)微含量變化,滿足科研實(shí)驗(yàn)對(duì)微量蛋白定量的需求[5];
操作便捷:試劑盒組分齊全(含5×G250染色液、PBS稀釋液、BSA標(biāo)準(zhǔn)品等),無需額外配制核心試劑,實(shí)驗(yàn)步驟清晰,反應(yīng)快速(室溫孵育3-5分鐘即可顯色),可快速完成批量檢測(cè),適合常規(guī)實(shí)驗(yàn)室操作[3];
適用性強(qiáng):適用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、蛋白提取液等多種樣本類型,受大部分緩沖液成分干擾小,巰基乙醇、二硫蘇糖醇等還原劑對(duì)檢測(cè)影響較小[3];
易判讀:顯色反應(yīng)穩(wěn)定,藍(lán)色復(fù)合物顏色清晰,吸光度測(cè)定便捷,可通過酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)兩種方式檢測(cè),適配不同實(shí)驗(yàn)室設(shè)備[3]。
適用樣本類型
儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)
(一)儲(chǔ)存條件
試劑盒未開封時(shí):置于2-8℃避光干燥環(huán)境中保存,保存期限為9個(gè)月(自生產(chǎn)批次日期起);避免陽光直射、高溫潮濕環(huán)境,嚴(yán)禁冷凍保存,防止染色液失效[1][2];
試劑盒開封后:5×G250染色液、PBS稀釋液密封后置于2-8℃冷藏保存,可保存1個(gè)月,需加入干燥劑防止受潮;稀釋后的1×G250染色液可在4℃保存一周,需避光存放[3];
BSA標(biāo)準(zhǔn)品:未溶解的標(biāo)準(zhǔn)品按未開封試劑盒條件保存;溶解后置于-20℃分裝保存,避免反復(fù)凍融,建議1個(gè)月內(nèi)使用完畢,使用時(shí)梯度解凍[3][4]。
(二)注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品用于科研使用,不建議用于人體實(shí)驗(yàn)、臨床診斷、治療及相關(guān)應(yīng)用,違規(guī)使用后果自負(fù)[1];
實(shí)驗(yàn)操作需在潔凈實(shí)驗(yàn)臺(tái)面進(jìn)行,嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作規(guī)范,避免試劑污染、交叉污染;操作前需仔細(xì)閱讀完整說明書,嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟及孵育時(shí)間、溫度要求操作,移液需準(zhǔn)確規(guī)范,減少操作誤差[5];
試劑使用前需平衡至室溫(約25℃),避免溫度驟變影響顯色效果;5×G250染色液使用前需輕輕顛倒3-5次混勻,避免劇烈震蕩,防止染料聚集體影響檢測(cè)[3][4];
顯色反應(yīng)受時(shí)間與溫度影響較大,需保證樣品與標(biāo)準(zhǔn)品的測(cè)定在同一條件下進(jìn)行,顯色完成后建議在1小時(shí)內(nèi)完成吸光度檢測(cè),每組樣品建議設(shè)置3個(gè)技術(shù)重復(fù)[5];
考馬斯亮藍(lán)G-250染色能力ji強(qiáng),需注意比色杯和實(shí)驗(yàn)器具的清洗,可將比色杯在0.1mol/L HCl中浸泡數(shù)小時(shí)后沖洗干凈,避免染料殘留影響檢測(cè)結(jié)果[1];
使用前需仔細(xì)核對(duì)試劑盒品牌、貨號(hào)(140430)、批次及有效期,若發(fā)現(xiàn)試劑出現(xiàn)渾濁、沉淀、變色等異常,立即停止使用,并聯(lián)系供應(yīng)商處理;
實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的廢液、廢棄試劑及耗材,需按實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范進(jìn)行規(guī)范處理后,再進(jìn)行廢棄處理,避免環(huán)境污染;
樣本需新鮮采集、規(guī)范處理,若樣品蛋白濃度超出檢測(cè)線性范圍,需先jin行梯度稀釋,使吸光度落在有效區(qū)間內(nèi)再進(jìn)行測(cè)定;待測(cè)蛋白中若堿性氨基酸(組an酸、精an酸、賴氨酸)含量異常,可能影響定量準(zhǔn)確性[5]。
訂購(gòu)信息
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以上信息僅供參考,具體請(qǐng)已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。


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