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產(chǎn)品概述
本產(chǎn)品為艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊抗小鼠免疫球蛋白G(IgG)重鏈和輕鏈的多克隆抗體,貨號A90-116P??贵w以未標記的完整IgG形式提供,可識別小鼠IgG的重鏈和輕鏈,同時與其他小鼠免疫球蛋白(IgA、IgM等)的輕鏈有交叉反應。該抗體適用于酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)、免疫細胞化學(ICC)、免疫組化(IHC)及蛋白質(zhì)印跡(WB)等多種檢測平臺,作為通用型二抗或捕獲抗體使用,廣泛應用于小鼠免疫球蛋白的定性和定量分析。
核心參數(shù)
參數(shù) 詳細信息
靶標 小鼠IgG重鏈和輕鏈
反應種屬 小鼠
應用 ELISA, ICC, IHC, WB
宿主 山羊
克隆性 多克隆
形式 完整IgG
同型 IgG
偶聯(lián)物 未偶聯(lián)
純度 抗原親和純化
濃度 1 mg/ml
保存條件 2 8 °C
有效期 收貨后2年
緩沖液 磷酸鹽緩沖液(PBS),含0.09%疊d化鈉
制備與純化
本抗體采用抗原親和層析法進行純化。將小鼠IgG抗原偶聯(lián)至瓊脂糖凝膠珠上,裝柱后使山羊抗血清通過親和柱,特異性結(jié)合的抗體被洗脫收集。免疫球蛋白濃度通過比爾定律測定,設(shè)定1 mg/mL IgG在A280波長的吸光度為1.4。
經(jīng)免疫電泳和ELISA驗證,該抗體與小鼠IgG具有特異性反應,同時可與其它小鼠免疫球蛋白(IgA、IgM、IgD、IgE)共有的輕鏈結(jié)合。未檢測到針對非免疫球蛋白血清蛋白的抗體。該抗體可能與其他物種(如大鼠、人、兔等)的IgG發(fā)生交叉反應,具體需由用戶驗證。
應用與推薦稀釋度
下列推薦稀釋度為起始參考值,用戶需根據(jù)具體實驗體系進行優(yōu)化。部分應用尚未經(jīng)我們實驗室嚴格驗證。
應用 推薦稀釋度 備注
ELISA 1:1000 – 1:30,000(檢測用)<br>1:100 – 1:500(包板用) 作為檢測抗體時按高稀釋度使用;作為包被抗體時按低稀釋度使用
免疫細胞化學(ICC) 1:200 – 1:2,000 適用于細胞爬片或培養(yǎng)細胞的固定后染色
免疫組化(IHC) 1:200 – 1:2,000 適用于石蠟切片或冰凍切片,需優(yōu)化封閉條件
蛋白質(zhì)印跡(WB) 1:1,000 – 1:30,000 用于檢測轉(zhuǎn)移至膜上的小鼠IgG或含IgG融合蛋白
產(chǎn)品特性說明
特異性與交叉反應
本抗體為抗重鏈和輕鏈(H+L)類型,識別小鼠IgG的完整分子。其優(yōu)勢在于可同時結(jié)合IgG的重鏈(約50 kDa)和輕鏈(約25 kDa),因此無論在小鼠IgG的天然構(gòu)象還是變性還原條件下均能有效識別。由于輕鏈在小鼠各免疫球蛋白亞類中高度保守,該抗體也會與小鼠IgA、IgM等其他免疫球蛋白發(fā)生反應,這一點在檢測含有多種免疫球蛋白的樣本時需注意。
可能存在的種屬交叉反應:基于序列同源性,該抗體可能與其它哺乳動物(如大鼠、人、兔)的IgG或有交叉,建議在異種樣本中使用時設(shè)置適當?shù)年幮詫φ蘸吞禺愋则炞C。
未偶聯(lián)形式的靈活性
本抗體為未偶聯(lián)形式(Unconjugated),用戶可根據(jù)下游檢測需要自行標記酶(HRP、AP)、生物素、熒光染料(FITC、Cy3、Alexa Fluor系列)或納米顆粒。未偶聯(lián)抗體避免了預標記可能導致的活性損失,提供了最大的實驗設(shè)計靈活性。
儲存穩(wěn)定性
在2-8°C條件下可穩(wěn)定保存2年(自收貨之日起)。緩沖液為含0.09%疊d化鈉的PBS,疊d化鈉作為防腐劑可抑制微生物生長。注意:若計劃將本抗體用于細胞培養(yǎng)或體內(nèi)實驗,需通過透析或脫鹽柱去除疊d化鈉,因其對細胞具有毒性。
本抗體常用于以下場景:
ELISA:作為檢測抗體,夾心法檢測小鼠單克隆抗體雜交瘤上清中的抗體含量。
蛋白質(zhì)印跡:檢測表達的重組小鼠IgG融合蛋白或免疫沉淀后的小鼠IgG。
免疫組化/免疫細胞化學:檢測小鼠來源的一抗在組織或細胞上的結(jié)合(需注意一抗宿主種屬與二抗匹配)。
質(zhì)量控制:定量分析生物制品(如治療性單抗)中殘留的小鼠IgG雜質(zhì)。
總結(jié):本山羊抗小鼠IgG(H+L)親和純化抗體具有寬反應譜、高純度和長有效期(2年)的特點,適用于ELISA、ICC、IHC和WB等多種免疫檢測技術(shù)。抗體濃度為1 mg/ml,推薦稀釋度范圍寬廣(WB/ELISA最高可達1:30,000),兼顧經(jīng)濟性和信號強度。作為未偶聯(lián)形式,用戶可根據(jù)實驗需求靈活標記不同檢測標簽。需注意該抗體識別輕鏈,因此會與小鼠其他免疫球蛋白發(fā)生交叉反應;同時可能與其他物種IgG有交叉,實驗設(shè)計時需酌情驗證和優(yōu)化。本抗體是檢測總小鼠IgG、篩選雜交瘤克隆、分析免疫沉淀復合物以及進行小鼠免疫應答研究的基礎(chǔ)工具之一。
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