高效液相色譜(HPLC)的原理與正反模式
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高效液相色譜(HPLC)是什么?
高效液相色譜(HPLC)是分析化學領域中的一項核心技術。常規(guī)的HPLC分析廣泛應用于藥物研發(fā)、質量控制(QC)與質量保證(QA),以及食品和環(huán)境檢測等多個領域的實驗室中。此外,也存在一些專門化的液相色譜技術,如制備型HPLC、凝膠滲透色譜(GPC)以及超高效液相色譜(UHPLC)。實際應用中具體選擇何種技術,取決于待測樣品的性質與需要分析的含量。
高效液相色譜(HPLC)的分離過程包括將少量液體樣品注入填充有細小顆粒固定相(通常粒徑為3–5μm)的HPLC色譜柱中。通過高壓泵輸送的流動相推動樣品中各組分在色譜柱內遷移,實現高效分離。在質量控制(QC)與質量保證(QA)實驗室的常規(guī)分析中,所使用的液相流動相典型流速范圍為1–2mL/min。
高效液相色譜(HPLC)的分離原理
高效液相色譜(HPLC)的分離原理主要基于樣品分子與色譜柱中填料顆粒之間發(fā)生的多種化學作用與物理吸附。這些相互作用直接決定了HPLC色譜柱的選擇性。目前存在種類豐富的HPLC色譜柱和填料類型,以適應日益拓展的應用需求。借助化學鍵合相所具有的不同選擇性,可實現測試樣品中各組分的有效分離。在此基礎上,當這些被分離的組分隨流動相離開色譜柱后,會由HPLC檢測器進行定性與定量檢測。
高效液相色譜(HPLC)的正相和反相模式
在高效液相色譜(HPLC)中,分離機制基于分子極性的差異。根據“相似相溶”原理,極性相近的分子間更容易發(fā)生吸附或相互作用;反之,極性差異大的分子間作用力較弱,甚至可能出現排斥。
在正相色譜(NP-HPLC)模式下,固定相為極性填料,流動相為非極性溶劑。此時,非極性物質因與固定相作用較弱而洗脫較早,極性物質則因較強保留而洗脫時間較長。
而在反相色譜(RP-HPLC)——目前HPLC分析中最常用的分離模式中,固定相為非極性,流動相為極性溶劑。極性物質與固定相相互作用弱,因此優(yōu)先被洗脫;而非極性組分由于在固定相上有更強的保留,其在色譜柱中的保留時間顯著延長。
高效液相色譜(HPLC)系統(tǒng)的產品推薦
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產品核心特性:
全自動多方法運行:系統(tǒng)可自動在最多4根色譜柱和15種溶劑之間切換,實現無人值守操作,極大延長了儀器有效運行時間。
多用戶平臺:支持多位用戶在同一系統(tǒng)上并行運行各自專屬的日常分析方法,提高了設備共享性和利用率。
高壓兼容與靈活混合:可在高達800bar壓力下運行方法,并利用BlendAssist軟件動態(tài)混合儲備液,實現方法靈活性與高性能的統(tǒng)一。
綠色可持續(xù):該系列產品已獲得MyGreenLabACT環(huán)保標簽,確認其在產品生命周期內對環(huán)境的影響更低。
關鍵性能指標:
系統(tǒng)壓力操作范圍:最高達800bar
流速范圍:0.2-10mL/min(視泵型號而定)
進樣體積:0.1–100µL(標準);0.1–1500µL(選配MultiDraw套件)
溶劑通道:最多可支持15種溶劑(需外接溶劑選擇閥)
色譜柱容量:4根
泵類型:可選二元泵、四元泵或全能泵
適用場景
安捷倫1260InfinityIII多方法系統(tǒng)非常適用于制藥、化工、食品等需要進行頻繁方法切換和質量控制(QC)的實驗室,是提升多項目研究效率的理想選擇。
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