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更新時(shí)間:2025-12-08 12:21:49瀏覽次數(shù):716次
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WEHI-3 [WEHI3]小鼠血細(xì)胞是髓系造血系統(tǒng)研究的經(jīng)典細(xì)胞系,1964年從輻照誘導(dǎo)的BALB/c小鼠腹水瘤中分離建立,隸屬于小鼠髓單核細(xì)胞源性腫瘤細(xì)胞系。該細(xì)胞系因穩(wěn)定保留髓系造血細(xì)胞的分化潛能及炎癥應(yīng)答特性,且易構(gòu)建動(dòng)物模型,成為解析髓系細(xì)胞分化機(jī)制、炎癥調(diào)控及白血病發(fā)病機(jī)理的核心工具細(xì)胞。
生物學(xué)特性上,WEHI-3細(xì)胞呈現(xiàn)典型的髓系細(xì)胞形態(tài),體外以懸浮生長(zhǎng)為主,部分細(xì)胞輕微貼壁,形態(tài)呈圓形或類(lèi)圓形,胞質(zhì)豐富呈嗜堿性,核呈腎形或不規(guī)則形,核仁清晰可見(jiàn),胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)少量嗜天青顆粒。其核心特征是兼具髓系分化潛能與腫瘤細(xì)胞特性:可被粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)誘導(dǎo)向粒細(xì)胞分化,或被巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)誘導(dǎo)向巨噬細(xì)胞分化,分化后表達(dá)相應(yīng)成熟標(biāo)志物(粒細(xì)胞CD11b/Gr-1,巨噬細(xì)胞F4/80);體外增殖旺盛,倍增時(shí)間約18-24小時(shí),核型為近四倍體,分子層面存在Myb基因異常表達(dá)及JAK/STAT通路持續(xù)激活。
體外培養(yǎng)WEHI-3細(xì)胞需精準(zhǔn)維持其髓系細(xì)胞特性,zui適環(huán)境為37℃、5% CO?的恒溫恒濕培養(yǎng)箱,推薦使用添加10%胎牛血清(FBS)、1%抗菌藥物混合液的RPMI 1640培養(yǎng)基,添加2mM氨基戊二酸可提升細(xì)胞增殖穩(wěn)定性。培養(yǎng)時(shí)需密切監(jiān)測(cè)細(xì)胞密度,當(dāng)密度達(dá)到1×10?-2×10?個(gè)/mL時(shí)及時(shí)傳代,避免密度過(guò)高導(dǎo)致細(xì)胞聚團(tuán)壞死。傳代時(shí)無(wú)需消化,直接用wan全培養(yǎng)基按1:3-1:5比例稀釋接種即可。特別注意:該細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)且易聚團(tuán),傳代前需輕柔吹打分散細(xì)胞;長(zhǎng)期培養(yǎng)需定期通過(guò)誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證潛能,同時(shí)檢測(cè)炎癥因子分泌水平,確保功能表型穩(wěn)定。
研究應(yīng)用中,WEHI-3細(xì)胞的價(jià)值具有鮮明針對(duì)性。髓系分化機(jī)制研究中,其雙向分化潛能可用于解析G-CSF/M-CSF受體信號(hào)通路(如JAK/STAT、MAPK通路)在髓系細(xì)胞定向分化中的調(diào)控作用,篩選分化相關(guān)關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子;炎癥研究領(lǐng)域,該細(xì)胞系受脂多糖(LPS)刺激后可大量分泌TNF-α、IL-6、IL-1β等炎癥因子,是炎癥信號(hào)通路解析及抗炎藥物篩選的核心模型;白血病研究方面,可構(gòu)建小鼠白血病模型(腹腔或靜脈接種),模擬髓系白血病的發(fā)病過(guò)程,用于探究白血病干細(xì)胞的干性維持機(jī)制及靶向治療策略;此外,在免疫調(diào)控研究中,其分化后的巨噬細(xì)胞可作為吞噬細(xì)胞模型,評(píng)估免疫調(diào)節(jié)劑對(duì)吞噬功能的影響及對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷活性。
需注意的是,WEHI-3細(xì)胞為腫瘤源性細(xì)胞,其分化特性與正常髓系細(xì)胞存在差異,實(shí)驗(yàn)結(jié)論需結(jié)合原代骨髓細(xì)胞驗(yàn)證;長(zhǎng)期體外培養(yǎng)易出現(xiàn)分化潛能衰減,建議選用10-30代的低代次細(xì)胞開(kāi)展關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)。但憑借穩(wěn)定的髓系表型、旺盛的增殖活性及對(duì)刺激的高應(yīng)答性,WEHI-3細(xì)胞已成為髓系造血系統(tǒng)研究的標(biāo)gan模型,為造血機(jī)制解析、炎癥疾病研究及白血病治療研發(fā)提供關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)支撐。
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