R2A瓊脂培養(yǎng)基（即用型袋裝）(200ml)（藥典）用途：用于純化水中菌落總數(shù)的測定，（EP、USP、Chp標(biāo)準(zhǔn)）

成分（g/L）

檢驗(yàn)原理：

酵母浸出粉、蛋白胨、酸蛋白水解物提供氮源、維生素、生長因子；葡萄糖、為可發(fā)酵糖類；可溶性淀粉可以吸收菌在復(fù)蘇過程產(chǎn)生的有害物質(zhì)；丙酮酸鈉可增強(qiáng)細(xì)菌的復(fù)蘇。磷酸氫2鉀為酸堿緩沖劑；無水硫酸mei提供二價(jià)陽離子；瓊脂為凝固劑。

使用方法：

步驟1【復(fù)溶加熱】：將未拆封的HBBD培養(yǎng)基（保留外層包裝袋）wan全浸入100℃沸水浴中。

加熱方式：

 建議使用電磁爐+不銹鋼鍋/不銹鋼桶等容器（加水至wan全浸沒袋體）。或使用實(shí)驗(yàn)室水浴鍋（需注意升溫較慢，建議提前預(yù)熱）

 ·加熱時(shí)容器勿wan全密封，避免壓力升高導(dǎo)致袋內(nèi)漏液。

 ·可選用帶孔的容器蓋，或留出一些縫隙排氣----詳情見視頻。

步驟2【溶解】：持續(xù)加熱20~30分鐘后，輕搖袋體確認(rèn)培養(yǎng)基wan全溶解（均勻液態(tài)無凝塊）。

步驟3【冷卻】：取出袋體，自然冷卻至45℃~50℃（手感微熱不燙）。

步驟4【無菌傾注】：在無菌環(huán)境下，撕開外層包裝，擰開瓶蓋，將培養(yǎng)基緩緩傾注至無菌平皿中，靜置凝固后使用。

儲存條件及有效期

1.2-25℃保存。

2.本產(chǎn)品在儲存條件下有效期為六個(gè)月。

使用方法

將本品完整包裝放置于100℃沸水浴中加熱20-30min，待培養(yǎng)基至培養(yǎng)基wan全溶解后冷卻至45℃~50℃時(shí)，撕開外層包裝，在無菌環(huán)境中擰開蓋子，將培養(yǎng)基傾入無菌平皿中，凝固后備用。

注意事項(xiàng)

1.若出現(xiàn)污染、破損、變色、泄露等現(xiàn)象時(shí)，則不能使用。

2.水浴加熱過程中無需打開外層包裝，產(chǎn)品內(nèi)部有少量氣體受熱后出現(xiàn)膨脹為正常現(xiàn)象。

3.使用后的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行消毒處理。

4.本產(chǎn)品使用方法非強(qiáng)制性，如用戶有具體參考資料可進(jìn)行相應(yīng)調(diào)整。

不同藥典關(guān)于純化水的微生物檢測方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

中國藥典

  【檢查】 微生物限度 取本品不少于1ml，按薄膜過濾法處理后，采用 R2A 瓊脂培養(yǎng)基，30～35℃培養(yǎng)不少于5天，依法檢查（通則1105），每1ml供試品中需氧菌總數(shù)不得過100cfu。

操作簡述：

  除葡萄糖、瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH值使加熱后在25℃的pH值為7.2±0.2，加入瓊脂，加熱溶化后，再加入葡萄糖，搖勻，分裝，滅菌。 R2A 瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查試驗(yàn) 照通則1105中“計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查"的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查方法進(jìn)行，試驗(yàn)菌株為銅綠假單胞菌和枯草芽孢桿菌。應(yīng)符合規(guī)定。

USP標(biāo)準(zhǔn)

  在美國藥典中，推薦使用0.45μm薄膜過濾法，并同時(shí)使用高營養(yǎng)培養(yǎng)基（平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（PCA））于30-35℃培養(yǎng)72小時(shí)以上，和低營養(yǎng)培養(yǎng)基（R2A瓊脂）于20-25℃培養(yǎng)96小時(shí)以上。檢測標(biāo)準(zhǔn)為：≤100cfu/ml 。

操作簡述：（可根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整）

  量取10ml充分混勻的水樣，以無菌操作加入安裝好的薄膜過濾器內(nèi)，過濾。并用pH7.0的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量為100ml，共沖洗1次。過濾后，取出濾膜，正面朝上貼于瓊脂平板上。共制備2張濾膜，一張濾膜貼于平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基平板（高營養(yǎng)培養(yǎng)基）置30℃~35℃生化培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)2~3天，計(jì)數(shù)。另一張濾膜貼于R2A瓊脂平板（低營養(yǎng)培奍基），置20℃~25℃生化培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)5~7天，計(jì)數(shù)。以培養(yǎng)基平板上菌落數(shù)生長較多者作為檢測結(jié)果， 按比例折算為1ml純化水中的微生物數(shù)量后報(bào)告。

EP標(biāo)準(zhǔn)

  在歐洲藥典中使用薄膜過濾法（0.45μm 孔徑濾膜），使用R2A瓊脂培養(yǎng)基在30℃～35℃培養(yǎng)5天以上。 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：≤100cfu/mL。

操作簡述：（可根據(jù)實(shí)際情況訓(xùn)整）

  量取10ml充分混勻的水樣，以無菌操作加入安裝好的薄膜過濾器內(nèi)，過濾。并用pH7.0的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液沖洗濾膜,每張濾膜每次沖洗量為100ml，共沖洗1次。過濾后，取出濾膜，正面朝上貼于R2A瓊脂平板上，置30℃～35℃生化培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)5天，計(jì)數(shù)。按比例折算為1ml純化水中的微生物數(shù)量后報(bào)告。

R2A瓊脂培養(yǎng)基（即用型袋裝）(200ml)（藥典）微生物靈敏度試驗(yàn)：

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株，放置30-35℃需氧培養(yǎng)18小時(shí)。