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當前位置:伊萊博生物科技(上海)有限公司>>實驗技術(shù)服務(wù)>>細胞實驗服務(wù)>> 軟瓊脂克隆形成服務(wù)
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所 在 地上海市
更新時間:2026-03-20 15:34:22瀏覽次數(shù):1433次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)底層瓊脂:起支撐作用
上層瓊脂:細胞懸浮其中,無法貼壁
只有惡性程度高 / 腫瘤干細胞樣的細胞能在懸浮狀態(tài)下增殖形成肉眼可見的克隆。
2× 培養(yǎng)基(含 20% FBS)
1.2% 低熔點瓊脂糖(底層)
0.7% 低熔點瓊脂糖(上層)
6 孔板
1.2% 瓊脂: 2× 培養(yǎng)基 = 1:1混合(終濃度 0.6%)
每孔加 2 mL,室溫凝固
0.7% 瓊脂: 2× 培養(yǎng)基 = 1:1混合(終濃度 0.35%)
加入細胞懸液,混勻
細胞密度:1×103~1×10? / 孔
每孔加 1~1.5 mL,室溫凝固
37℃、5% CO? 培養(yǎng) 14~21 天
每 3~4 天滴加少量培養(yǎng)基保濕
PBS 輕洗
結(jié)晶紫或 MTT 染色
顯微鏡下計數(shù)直徑>50~100 μm的克隆數(shù)
克隆數(shù)越多、體積越大 → 惡性程度 / 成瘤能力越強
給藥組克隆數(shù)減少 → 抑制惡性表型
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