大鼠組蛋白H2b(H2b)ELISA檢測試劑盒

檢測原理 :

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗（ ELISA）。在預包被 大鼠組蛋白H2B(H2B)止抗體（固相抗體）的微孔酶標板中，加入 大鼠組蛋白H2B(H2B) 校準品和待測樣本，再加入另一株 HRP標記的抗 大鼠組蛋白H2B(H2B) （酶標抗體），經(jīng)過溫育與充分洗滌，去除未結合的組分，在微孔板固相表面形成固相抗體 -抗原-酶標抗體的夾心復合物。加底物 A和 B，底物在 HRP催化下，產(chǎn)生藍色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下，最終轉(zhuǎn)化為黃色，在酶標儀  450nm波長上測定吸光度（OD值），吸光度（OD值）與待測樣品中 大鼠組蛋白H2B(H2B)的濃度正相關。擬合校準品曲線，可以計算出樣本中 大鼠(H2B)的濃度。

所需器材和試劑

1、 酶標儀 (波長 450nm 濾光片)

2、37°C  恒溫箱(不推薦使用細胞用 CO2 培養(yǎng)箱)

3、 自動洗板機或多道移液器 /5ml 滴管(手工洗板用)

4、 無菌的 EP 管及一次性吸頭

5、 精密的單道 (0.5-10μL, 5-50μL, 20-200μL,  200-1000μL)和多通道移液器(移液器使用前需校準)。

6、吸水紙及加樣槽

7、去離子水或蒸餾水

試劑盒組成：

標本收集 :

1、收集血液的試管應為一次性的無熱原，無內(nèi)毒s試管。

2、 血漿抗凝劑推薦使用 EDTA 。避免使用溶血，高血脂標本。

3、標本應清澈透明，懸浮物應離心去除。

4、 標本收集后若不及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于 -20 ℃ , -70 ℃電冰箱內(nèi)，避免反復凍融，3-6月內(nèi)檢測。

5、 如果您的樣本中檢測物濃度高于標準品值，請根據(jù)實際情況， 做適當倍數(shù)稀釋 (建議做預實驗，以確定稀釋倍數(shù))。

儲存條件：

大鼠組蛋白H2b(H2b)ELISA檢測試劑盒

樣品采集及保存：

1、 血清全血樣本室溫放置 2小時或 2-8°C 過夜。1000×g 離心20分鐘，取上清?？闪⒓礄z測，或按一次使用量分裝凍存于-20°C  或-80°C。

2、 血漿抗凝劑推薦使用 EDTA-Na2/K2，樣品采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C，1000×g 離心15分鐘，取上清。可立即檢測，或按一次使用量分裝凍存于-20°C  或-80°C。其他抗凝劑的使用及選擇請查看樣品制備指南。

3、組織樣本組織樣本一般制成組織勻漿.

4、 細胞培養(yǎng)上清收集上清液， 2-8°C，2500rpm 離心 5min，收集澄清的細胞培養(yǎng)上清。立即用于檢測，或按一次使用量分裝于-80°C  凍存?zhèn)溆谩?/span>

5、細胞裂解液

注意：注意事項同組織樣本。

6、 其他生物樣本 2-8°C，1000×g 離心樣品 20 分鐘。收集上清液立即用于檢測，或按 一次使用量分裝于-80°C  凍存?zhèn)溆谩?/span>

操作步驟：

步驟 1： 向孔中加入 100ul 標準品或待測樣品，貼上覆膜， 37°C 靜置孵育 90 分鐘。

洗板： 洗板 2 次。不浸泡。

步驟 2： 加入 100ul 生物s-抗體工作液，貼上覆膜， 37°C 靜置孵育 60 分鐘。

洗板： 洗板 3 次。每次浸泡 1 分鐘。

步驟 3： 加入 100ul HRP-鏈霉親和素(SABC)工作液，貼上覆膜，37°C 靜置孵育 30 分鐘。

洗板： 洗板 5 次。每次浸泡 1 分鐘。

步驟 4： 添加 90ul TMB 顯色底物。貼上覆膜， 37°C 靜置孵育 10-20 分鐘(請使用 TMB  顯色精準控制方法)。

步驟 5： 添加 50ul 反應終止液。立即在 450nm 處讀取 OD450 值并計算。

注：以上僅供參考!希望以上信息能幫助您做出合適的選擇!

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