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當(dāng)前位置：上?？茘沟律锟萍加邢薰?/a>>>感受態(tài)>>表達(dá)大腸桿菌感受態(tài)>> ArcticExpress(DE3)感受態(tài) CC96183
| 參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)
品 牌科嵐德
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間：2026-02-12 10:43:51瀏覽次數(shù)：182次
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Rosetta 2(DE3) 感受態(tài) CC96185
ArcticExpress(DE3)pRARE2 感受態(tài)
ArcticExpress(DE3)感受態(tài) CC96183
T7 Express LysY/Iq 感受態(tài) CC96172
| 供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 20 × 100 μL/100 × 100 μL |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 科研實(shí)驗(yàn) |
產(chǎn)品概述
ArcticExpress(DE3)來源于E. coli B菌株，為Lon和OmpT蛋白酶缺陷型菌株，可促進(jìn)表達(dá)蛋白的穩(wěn)定。ArcticExpress(DE3)菌株染色體DNA中整合了λ噬菌體DE3區(qū)，使得ArcticExpress(DE3)菌株可同時(shí)表達(dá)T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶，廣泛用于pET系列，pGEX，pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。ArcticExpress(DE3)菌株具有四環(huán)素，慶大霉素抗性。endA1突變有利于質(zhì)粒DNA的穩(wěn)定。[cpn10cpn60 GentR]的存在使ArcticExpress(DE3)可以表達(dá)適應(yīng)低溫的伴侶蛋白Cpn10和Cpn60(來自嗜冷菌—Oleispira antarctica)。Cpn10和Cpn60伴侶蛋白在4-12℃表現(xiàn)出較高活性，ArcticExpress(DE3)細(xì)胞中表達(dá)時(shí)，可降低重組蛋白包涵體的形成，增加可溶重組蛋白的表達(dá)量及生物活性，比傳統(tǒng)的原核表達(dá)伴侶蛋白GroEL、GroES等具有更強(qiáng)的促蛋白折疊功能。ArcticExpress(DE3)感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率達(dá)108 cfu/μg DNA。
● 高轉(zhuǎn)化效率：>1x108 cfu/µg pUC19 DNA
● 可降低重組蛋白包涵體的形成，增加可溶重組蛋白的表達(dá)量及生物活性
| 組分 | CC96183-01 | CC96183-02 | CC96183-C |
| ArcticExpress(DE3)化學(xué)感受態(tài) | 10 × 100 μL | 100 × 100 μL | 定制 |
基因型：E. coli B F– ompT hsdS (rB – mB –) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR ]
-80℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20℃或者液氮中保存!
ArcticExpress(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞適用于外源基因在原核系統(tǒng)中的高效表達(dá)。
1. 解凍感受態(tài)細(xì)胞：從-80 ℃取出感受態(tài)細(xì)胞，冰上融化約5-10 min，然后立即進(jìn)行DNA樣品的轉(zhuǎn)化。
2. DNA樣品的轉(zhuǎn)化：每100 μL感受態(tài)可加入0.5-10 μL待轉(zhuǎn)化DNA樣品（例如質(zhì)粒、連接產(chǎn)物或重組產(chǎn)物等），然后輕輕彈擊管底約5-6次，立即冰上靜置孵育30 min。
• 待轉(zhuǎn)化DNA樣品的加入體積不宜超過感受態(tài)細(xì)胞體積的1/10。
• 加入待轉(zhuǎn)化DNA樣品后應(yīng)輕柔彈擊混勻，避免使用移液槍劇烈吹打混勻。
• 用于質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化時(shí)可將冰浴時(shí)間縮短至5-10 min；用于連接產(chǎn)物或重組產(chǎn)物轉(zhuǎn)化時(shí)，建議冰浴時(shí)間為15-30 min以提高轉(zhuǎn)化效率。
3. 熱激處理：冰浴后，將裝有感受態(tài)和DNA樣品的的離心管快速置于42℃水浴中，靜置熱激90 s。隨后立即轉(zhuǎn)移至冰上靜置2-3 min以快速冷卻。
• 熱激時(shí)間需要精確控制在45-90 s。
• 熱激及轉(zhuǎn)移至冰浴過程中禁止晃動(dòng)離心管。
4. 復(fù)蘇培養(yǎng)：加入900 μL 室溫或37 ℃預(yù)熱的LB培養(yǎng)基（或SOC培養(yǎng)基等），上下顛倒數(shù)次混勻，然后將離心管傾斜放置在恒溫?fù)u床中，37℃ 220 rpm復(fù)蘇培養(yǎng)45 min。
• 37℃為常規(guī)復(fù)蘇溫度，若轉(zhuǎn)入質(zhì)粒對(duì)溫度敏感或其它特殊情況需根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置合適的溫度。
5. 收菌涂板：用于質(zhì)粒轉(zhuǎn)化時(shí)，復(fù)蘇后可直接取50-100 μL菌液涂板；用于連接產(chǎn)物或重組產(chǎn)物轉(zhuǎn)化時(shí)，建議先5000 g，1 min室溫離心，吸棄約900 μL上清，然后用剩余的約100 μL重懸菌液，涂布到含相應(yīng)抗生素的LB平板上。
6. 過夜培養(yǎng)：將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
• 培養(yǎng)前需要將平板在超凈臺(tái)中稍微晾至無明顯水漬，有利于形成單克隆。
• 37℃為常規(guī)培養(yǎng)溫度，若轉(zhuǎn)入質(zhì)粒對(duì)溫度敏感或其它特殊情況需根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置合適的溫度。
感受態(tài)類型 | 化學(xué)感受態(tài) |
感受態(tài)菌株名稱 | ArcticExpress(DE3) |
種屬 | 大腸桿菌 |
轉(zhuǎn)化效率 | 高效率 (>1x108 cfu/µg pUC19 DNA) |
菌株用途 | 表達(dá) |
應(yīng)用特征 | 適用于外源基因在原核系統(tǒng)中的高效表達(dá) |
是否可進(jìn)行藍(lán)白斑篩選 | 否 |
菌株抗性 | 四環(huán)素；慶大霉素 |
培養(yǎng)基 | LB |
培養(yǎng)條件 | 37℃，有氧 |
誘導(dǎo)方法 | - |
保存條件 | -80℃ |
運(yùn)輸條件 | 干冰 |
包裝規(guī)格 | 管裝 (100 µL/管) |
出品公司 | ToloBio |
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