目錄:上海樂之盛世生命科技有限公司>>分子生物學試劑>>Solution溶液>> A1004Tetracycline Hydrochloride Solution
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
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Tetracycline Hydrochloride Solution 是美國 Zymo Research 原廠推出即用型無菌鹽酸四-環(huán)素乙醇儲備液,僅限科研使用(RUO),標準濃度 10 mg/mL,以 95% 乙醇作為溶劑天然無菌,有效成分純度≥98%。專為大腸桿菌質(zhì)粒、黏粒、BAC/PAC 大片段基因組載體擴增與陽性克隆篩選設計,省去粉末稱量、溶解、過濾除菌等繁瑣操作,開蓋稀釋即可配制抗性 LB 培養(yǎng)基,是分子克隆、多抗性載體篩選、大片段文庫構(gòu)建的經(jīng)典篩選抗生素。
四環(huán)素屬于廣譜抑菌抗生素,通過結(jié)合細菌核糖體 30S 亞基,阻斷氨酰 - tRNA 結(jié)合核糖體 A 位點,抑制細菌蛋白合成,對革蘭氏陽性、革蘭氏陰性菌均具備抑制效果;攜帶tet抗性基因的菌株可表達膜轉(zhuǎn)運蛋白,改變細胞膜通透性,將四環(huán)素排出胞內(nèi)實現(xiàn)耐藥,以此篩選攜帶四環(huán)素抗性標記的重組菌株。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝規(guī)格 | 貨期 |
A1004-5 | Tetracycline Hydrochloride-Solution - Reagent Grade | 1×5 mL | 現(xiàn)貨 |
A1004-25 | Tetracycline Hydrochloride-Solution - Reagent Grade | 5×5 mL(總 25 mL) | 現(xiàn)貨 |
參數(shù)項目 | 指標詳情 |
儲備液濃度 | 10 mg/mL |
溶劑體系 | 95% 乙醇(天然無菌) |
有效成分純度 | ≥98% |
推薦工作終濃度 | 10–20 μg/mL(常規(guī)篩選 15 μg/mL) |
儲存條件 | -20℃避光冷凍,避光保存,避免反復凍融 |
抑菌機理 | 結(jié)合核糖體 30S 亞基,阻斷細菌蛋白翻譯過程 |
抗性機制 | tet基因表達膜外排蛋白,將四環(huán)素泵出菌體 |
適用宿主 | 大腸桿菌等革蘭氏陰性菌、部分革蘭氏陽性菌 |
適配載體 | 質(zhì)粒、黏粒、BAC、PAC 大片段基因組載體 |
產(chǎn)地 | 美國加州 Zymo Research 原廠生產(chǎn) |
l LB 液體 / 固體培養(yǎng)基高壓滅菌后冷卻至 40–50℃,高溫會降解四環(huán)素;
l 按 1:500–1:1000 比例添加儲備液(1L 培養(yǎng)基添加 1–2 mL 母液,終濃度 10–20 μg/mL);
l 充分混勻,固體培養(yǎng)基直接倒平板,液體培養(yǎng)基分裝使用;
l 四環(huán)素對光敏感,抗性平板 4℃避光密封保存,液體培養(yǎng)基現(xiàn)配現(xiàn)用;
l BAC 低拷貝載體擴增可適度提高工作濃度,減少載體丟失。
l 含 tet 抗性基因陽性克隆篩選:大腸桿菌轉(zhuǎn)化后涂布四環(huán)素抗性平板,篩選重組質(zhì)粒、黏粒陽性菌落;
l BAC/PAC 大片段基因組文庫培養(yǎng):維持大型低拷貝載體穩(wěn)定傳代,防止載體丟失;
l 多抗性載體聯(lián)合篩選:搭配氨芐、卡那、氯-霉素開展雙抗、三抗篩選實驗;
l 原核穩(wěn)定質(zhì)粒傳代培養(yǎng):長期搖菌提質(zhì)粒,維持質(zhì)粒穩(wěn)定不丟失;
l 微生物蛋白合成機制基礎研究:體外抑菌、翻譯抑制對照實驗;
l 高通量質(zhì)粒庫、基因組測序文庫大批量擴增制備。
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